Genetiškai modifikuotos imuninės ląstelės rodo potencialą užkirsti kelią organų atmetimui

Žurnale „Frontiers in Immunology“ buvo pristatyta principinė ląstelių terapija, galinti „nuginkluoti“ labai imuniniu požiūriu jautrius pacientus prieš organų transplantaciją. Mokslininkai sukūrė reguliacines T ląsteles (Treg) su chimeriniu anti-HLA antikūnų receptoriumi (CHAR) – iš esmės su HLA-A2 baltymo „masalu“, kuris aktyvuoja Treg ląsteles, kai jos kontaktuoja su B ląstelėmis, gaminančiomis anti-HLA-A2 antikūnus. In vitro šios CHAR-Treg ląstelės atpažino ir slopino didelio afiniteto IgG gamybą iš anksto jautriems pacientams, išlaikydamos Treg ląstelių „tapatybę“ (FOXP3/HELIOS) ir nežudydamos tikslinių ląstelių. Tai suteikia galimybę tikslinei desensibilizacijai be visiško imunosupresijos.

Tyrimo kontekstas

Transplantologijoje pagrindinis „interesų konfliktas“ yra antikūnai prieš donoro HLA antigenus. Po transfuzijų, nėštumų ar ankstesnių transplantacijų recipientas dažnai jaučia jautrumą: kraujyje jau cirkuliuoja anti-HLA IgG ir B ląstelių atminties antikūnai, pasiruošę greitai „išsiskleisti“. Tokie pacientai yra mažiau suderinami, ilgiau laukia organo ir turi didesnę ūminio ir lėtinio antikūnų atmetimo riziką. Standartiniai desensibilizacijos protokolai (plazmaferezė / imunoadsorbcija, didelės IVIG dozės, rituksimabas, proteasomų inhibitoriai, imlifidazė) veikia plačiai ir maždaug: jie sumažina bendrą antikūnų ar ląstelių kiekį, tačiau nėra nukreipti į konkrečius „pavojingus“ klonus ir yra lydimi toksiškumo bei infekcijų rizikos.

Imuninė sistema turi savo „stabdį“ – reguliacines T ląsteles (Treg), kurios palaiko toleranciją „svetimšaliui“. Pastaraisiais metais Treg terapija tapo tikra klinikine strategija, tačiau „numatytoji“ versija yra neselektyvi: suleistos ląstelės neskiria, prieš kurį antigeną vystosi reakcija. Todėl tyrėjai bando „prisukti taikinį“ – aprūpinti Treg ląsteles dirbtiniais receptoriais, kurie suveikia tik tada, kai susiduria su tinkamu signalu. Taip kilo chimerinių receptorių (panašių į CAR technologijas dvasia) idėja, tačiau surinktų ne anti-CD19 pagrindu, o iš pačių HLA molekulių domenų, kad Treg ląstelės būtų aktyvuojamos šalia B ląstelių, gaminančių atitinkamus anti-HLA antikūnus.

Tokiems „tiksliniams“ Tregams keliami dvejopi svarbiausi reikalavimai. Pirma, jie turi išlikti tikraisiais Treg (išlaikyti FOXP3/HELIOS ir slopinamųjų programų), neperžengdami efektoriaus fenotipo ribų stiprios stimuliacijos fone. Antra, jų veikimas turi būti tikslingas: tiksliai slopinti alospecifinius B klonus ir plazmoblastus, minimaliai trukdyti likusiai imuninei sistemai, kad nepadidėtų infekcijų ir navikų rizikos gydymo išlaidos. Jei ši problema bus išspręsta, atsiras metodas, leidžiantis švelniai, tiksliai desensibilizuoti prieš transplantaciją ir sumažinti visiško imunosupresijos poreikį po jos.

Galiausiai, praktinis kontekstas: kai kuriems pacientams sensibilizacija nukreipta į vieną ar du „probleminius“ alelius (pvz., HLA-A2), ir būtent jie blokuoja prieigą prie organų. Ląstelių terapija, skirta tokiems „kliūtims“, gali išplėsti suderinamų donorų ratą, pagreitinti transplantaciją ir sumažinti antikūnų atmetimo dažnį, ypač vaikams ir recipientams, turintiems ilgalaikį „istorinį“ kontaktą su svetima HLA (daugkartinės transfuzijos, pakartotinės transplantacijos). Todėl anti-HLA sukeltų Treg ląstelių principo įrodymas yra svarbus žingsnis link personalizuotos imunomoduliacijos transplantologijoje.

Kaip struktūrizuota nauja ląstelė

• Konstrukcija: tarpląstelinis HLA-A2 domenas + vyrio CD8 + transmembraninis CD28 + signalizacijos „tandemas“ CD28-CD3ζ. Šis receptorius aktyvuojamas, kai B ląstelės paviršiuje yra anti-HLA-A2 antikūnas.
• Specifiškumas: CHAR-Treg „prasideda“ specifiškai nuo anti-A2 B ląstelių, nepaveikdamas kitų imunitetų.
• Saugus Treg profilis: po aktyvavimo jie nepraranda linijų žymeklių (FOXP3, HELIOS), t. y. jie išlieka „stabdžiais“ ir nevirsta „dujomis“.
• Necitotoksinis: skirtingai nei modifikuotos įprastinės CD4 T ląstelės su tuo pačiu receptoriumi, CHAR-Treg nenaikina anti-A2 ląstelių, bet slopina jų funkciją.

Kas tiksliai buvo patikrinta?

• Ex vivo paciento modelis: HLA-A2 presensibilizuotų pacientų kraujo mononuklearinės ląstelės buvo aktyvuotos stimuliais (HLA-A2-K562), tada pridėta CHAR-Treg ir išmatuota IgG (ELISA) bei B ląstelių sudėtis (spektrinio srauto citometrija, UMAP).
• Rezultatas: po 48 valandų ir 5 dienų IgG gamyba reikšmingai sumažėjo (2 iš 3 pacientų mėginių), B ląstelių dalis apskritai sumažėjo be akivaizdaus „pasirinkimo“ tarp potipių (naivios, atminties, ribinės zonos, plazmablastų).
• Autorių interpretacija: Tyrimo jautrumą galima padidinti atliekant anti-A2 specifinį ELISA ir atskirai vertinant IgG klases; reikia atlikti tyrimus su didesniu pacientų skaičiumi ir nustatyti kitus HLA alelius (pvz., A24).

Kodėl tai svarbu transplantacijai?

Šiandien 20 % pirminės transplantacijos ir iki 75 % pakartotinės transplantacijos pacientų jau turi anti-HLA antikūnų, o tai smarkiai sumažina tinkamų donorų ratą ir skatina dideles imunosupresijos dozes. Neselektyvūs desensibilizacijos protokolai (plazmaferezė, B ląstelių „nulinis nustatymas“) neveikia sklandžiai ir yra kupini komplikacijų – nuo infekcijų iki nefro- ir neurotoksiškumo (ypač vaikams). Tiksliniai Treg, veikiantys tik prieš „pavojingus“ B klonus, teoriškai leidžia išplėsti prieigą prie organų ir sumažinti bendrą toksiškumą po transplantacijos.

• Pagrindiniai galimi privalumai:
  • Prieš transplantaciją: „pašalinkite“ jautrinimą konkrečiam HLA ir padarykite pacientą palyginamą su nesensibilizuotu pacientu.
  • Po transplantacijos: sumažinti bazinio imunosupresinio gydymo dozes ir lėtinio antikūnų atmetimo riziką.
  • Be transplantacijos: šis metodas gali būti taikomas gydant HCV ir net persileidimo atvejais, kai motina sukuria antikūnus prieš tėvo HLA.

Ką sako patys autoriai ir spaudos pranešimai

MUSC komanda (JAV) šį darbą vadina „pirmuoju žingsniu tikslinės imunosupresijos link: slopinant būtent tas B ląsteles, kurios kelia grėsmę transplantacijai, o likusią imuninės sistemos dalį paliekant ramybėje“. Pranešime pabrėžiama galimybė sumažinti šalutinį poveikį ir „sudaryti vienodas sąlygas“ tiems, kuriems šiuo metu beveik neįmanoma persodinti dėl sunkios sensibilizacijos.

Kur ribos ir kas toliau?

• Tai yra in vitro/ex vivo principo įrodymas, atliktas su nedideliu skaičiumi pacientų mėginių: dar per anksti kalbėti apie klinikinį rezultatą. Reikalingi pirmieji žmonių tyrimai, skirtingų HLA patvirtinimas ir išsamūs mechanistikai (išskiriami faktoriai, nuo kontakto priklausantis slopinimas, CHAR-Treg transkriptomika).
• Svarbu išsiaiškinti specifiškumą ir saugumą: užtikrinti, kad slopinimas būtų griežtai nukreiptas į antigeną ir netrikdytų kitų imuniteto šakų.

Ką reikia atsiminti

• HLA-A2 „masalu“ sukonstruotos treg ląstelės atpažįsta ir slopina transplantacijai pavojingas B ląsteles.
• In vitro jie sumažina IgG gamybą jautriems pacientams ir palaiko Treg fenotipo stabilumą be citotoksiškumo.
• Tai tikslinė alternatyva neselektyviai desensibilizacijai, galinti sumažinti imunosupresijos dozes ir išplėsti transplantacijos prieinamumą. Kitas žingsnis – klinikiniai tyrimai.

Šaltinis: Valentín-Quiroga J. ir kt. Chimerinės anti-HLA antikūnų receptorių inžinerijos būdu sukurtos žmogaus reguliacinės T ląstelės slopina aloantigenui specifines B ląsteles iš iš anksto sensibilizuotų transplantacijos recipientų. „ Frontiers in Immunology“, paskelbta 2025 m. rugpjūčio 15 d. DOI: 10.3389/fimmu.2025.1601385