Be tablečių ir imunosupresijos: pirmoji pasaulyje β ląstelių transplantacija diabetui gydyti

Unikaliu atveju 42 metų vyrui, 37 metus sergančiam sunkia 1 tipo diabetu, buvo persodintos genetiškai modifikuotos salelių β ląstelės iš donoro, neskiriant nė lašo imunosupresantų. Švedijos ir Norvegijos tyrėjai panaudojo CRISPR-Cas12b, kad pašalintų pagrindinius HLA I ir II žymenis, o tada sustiprino „nesavarankiško“ CD47 ekspresiją, kad ląstelės „susilietų“ su recipiento audiniais ir išvengtų tiek adaptyvaus, tiek įgimto atmetimo. Tyrimas paskelbtas NEJM.

Kaip tai buvo sutvarkyta?

1. Izoliacija ir redagavimas

• Donoro salelių ląstelės buvo „susmulkintos“ į atskiras β ląsteles.
• CRISPR-Cas12b „išjungė“ B2M ir CIITA genus (HLA-I ir HLA-II pagrindą).
• Lentivirusinis transdukcija į ląsteles įterpė CD47 geną, blokuodamas makrofagų ir NK ląstelių atakas.
• Galutiniame UP421 produkte buvo ~86 % HLA I neigiamų, 100 % HLA II neigiamų ir beveik 50 % CD47 sustiprintų ląstelių.

2. Transplantacija

• Į dilbio raumenį į raumenis buvo suleista 79,6 mln. redaguotų β ląstelių – 17 mažų „karoliukų“ injekcijų išilgai skaidulų.
• Pacientas negavo steroidų, anti-CD3 ar ciklosporino.

3. Imuniteto kontrolė

• Įprastinės (neredaguotos) salelių ląstelės ir dvigubas nokautas sukėlė stiprų T ląstelių ir įgimtą atsaką: didžiausią aktyvumą 7–21 dienomis, aiškų IgM→IgG perjungimą ir citotoksiškumą PBMC+serumo kokteilyje.
• Hipoimuninės (HIP) ląstelės išgyveno 12 savaičių be atmetimo, antikūnų ar citotoksiškumo požymių.

4. Kasos funkcijos atkūrimas

• 0 savaitę C-peptido nebuvo, tačiau praėjus 4–12 savaičių po transplantacijos pacientui vartojant maistą, C-peptido kiekis padidėjo nuo gliukozės.
• Tuo pačiu metu EHD sumažėjo 42 %, o egzogeninio insulino paros dozė buvo padidinta, siekiant išvengti „hiperspikų“ ir apsaugoti naują transplantatą.
• PET-MRT patvirtino raumenyje esančių „salų“ išlikimą ir vaskuliarizaciją.

Saugumas ir šalutinis poveikis

Per 12 savaičių užfiksuoti tik 4 nepageidaujami reiškiniai (lengvas tromboflebitas ir rankų parestezija), nė vienas iš jų nebuvo sunkus ar susijęs su genetiškai modifikuotomis ląstelėmis.

Tyrimo reikšmė

• Pirmasis pasaulyje žmogus, kuriam atlikta hipoimuninė alogeninė salelių transplantacija be imunosupresijos.
• Nustatyta, kad CRISPR-Cas12b + CD47 perteklinė raiška apsaugo nuo T ląstelių, NK ląstelių, makrofagų ir antikūnų.
• Klinikinis įgyvendinamumas patvirtintas: stabili ir fiziologinė insulino sekrecija iš persodintų ląstelių.

„Tai įrodymas, kad genetiškai modifikuotos „nematomos“ β ląstelės gali išgelbėti pacientus nuo visą gyvenimą trunkančių tablečių ir imunosupresantų vartojimo“, – komentuoja dr. Johanas Schönas.

Tolesni veiksmai

Padidinus ląstelių dozę iki tokio lygio, kuris užtikrina visišką nepriklausomybę nuo insulino, ir pratęsiant stebėjimą, tokių transplantacijų serija ateityje galėtų suteikti realią galimybę „išgydyti“ milijonus žmonių, sergančių 1 tipo diabetu.