Hemoblastozių imunofenotinimas

Didelė pažanga hematologinių tyrimų, susijusių pastaraisiais metais su šiuolaikinių imunologinių metodų ir automatizuotų įrankių analizuojant ir rūšiavimas ląstelių periferiniame kraujyje ir kaulų čiulpuose naudoti - tėkmės citometrai. Tradicinė morfologinė ir cytochemical tyrimas substratas ląstelių ligos (kraujo, raudona kaulų čiulpų, limfmazgių, blužnies ir tt), daugeliu atvejų, ypač limfinio ligų, nereikia atskleisti visą įvairovę pasirinkimo tarp morfologiškai panašių formų pavidalą ir nustatyti patologinio klonas kilmę . Šios problemos gali būti išspręstos tik tiriant ląstelių imunologines savybes. Kiekvienas diferencijavimo kraujodaros ląstelių etapas turi savo rinkinį antigenų, kurie yra tarptautinės klasifikacijos žinomas kaip diferenciacijos ir diferenciacijos yra suskirstyti į grupes, paskirtą CD.

Trinkelių diferenciacijos neoplastinių pakitimų gali pasireikšti bet normalus ląstelių vystymosi stadijoje, todėl patologinės ląstelių klonas apibrėžiant substrato liga ir turintys tą patį imunologinio (arba) fenotipo charakteristika. Po to, kai iš šių žymeklių tyrimas ląstelėse gali būti nustatomas pagal bet kurį forma arba šio išradimo įgyvendinimo variante ligos yra nuoseklūs, t.y. Dėl imunologinės ląstelių fenotipas diferencinės diagnostikos, kuri yra labiausiai sunku limfinio sutrikimų pagrindu, dėl to, kad pagrindinis ląstelių substrato patologinių ligos yra beveik tos pačios rūšies ląstelių morfologiškai.

Fenotipo leidžia naudojant monokloniniai antikūnai būdinga blastic ląsteles ir brandus mieloidinės kraują, mono- limfocitinės seriją iš diferenciacijos antigenų (receptorius) ląstelės sienelės buvimą. Skyriuje "Organizmo imuninės sistemos būklės įvertinimas" iš dalies aprašyti ląstelių žymeklių ypatumai ir diagnostika; Toliau pateikiamas trumpas antigeninių ląstelių žymenų, taikomų hemoblastozės diagnozei, aprašymas. Dėl kraujo ląstelių ir raudonųjų kaulų čiulpų membranų galima nustatyti šiuos antigenus (žymenis).

• CD2 yra monomerinis transmembraninis glikoproteinas. Jis yra ant visų cirkuliuojančių T limfocitų paviršiaus ir kai kurių NK limfocitų. CD2 dalyvauja alternatyvioje T-limfocitų aktyvacijoje. Klinikinėje praktikoje CD2 nustatymas naudojant monokloninius antikūnus naudojamas ūmių T ląstelių leukemijų, limfomų, lėtinių uždegiminių ir imunodeficinių būsenų fenotipijai nustatyti.
• CD3 - baltymų kompleksas, susietas su antigenui specifiniu T ląstelių receptoriumi, yra pagrindinis T limfocitų funkcinis žymeklis. Tai palengvina aktyvinimo signalo perdavimą iš membranos į ląstelės citoplazmą. CD3 aptikimas yra skirtas ūmios T ląstelių leukemijos, limfomos (CD3 nėra išreikštas ne T-ląstelių limfoidiniais navikais) ir imunodeficito ligomis diagnozei nustatyti.
• CD4 - transmembraninis glikoproteinas išreiškiamas keletu T pagalbininkas pogrupyje (induktyvumo), sudarantis 45% periferinio kraujo limfocitai. Ankstyvosiose limfocitų vystymosi stadijose тимус, CD4 antigenai, taip pat CD8, yra išreikšti visų korkoviniai limfocitų. Meduliarinė timocitų, kuris yra panašus į subrendusio CD4 + periferinio kraujo T-ląstelių (T helperių ląstelių) fenotipo, arba jau išreikšti CD4, arba CD8 receptorius. Periferiniame kraujyje iki 5% ląstelių vienu metu žymima CD4 ir CD8. Kai kurioms monocitų ląstelėms gali būti silpna CD4 ekspresija. CD4 yra išreikšta daugeliu atvejų, T ląstelių limfomos, įskaitant mikozės mikozės, ir į HTVL-susijęs T ląstelių leukemija (HTLV - žmogaus T-limfotropinis virusas - žmogaus T-limfotropinis virusas).
• CD5 - vienos grandinės glikoproteinas, esantis visose brandžiose T limfocitose ir daugumoje timocitų, yra silpnai ekspresuojamas B limfocitais. CD5 yra aptikta neoplazminėse ląstelių B-ląstelių lėtinės limfocitinės leukemijos ir centrocetinės limfomos. Kitose piktybinių limfų ligų rūšyse - folikulinė limfoma, plaukuotųjų ląstelių leukemija, didelio ląstelių limfoma - CD5 nėra išreikšta.
• CD7 yra viengubas baltymas, anksčiausiai žymimas T-ląstelių diferenciacija. Jis išreiškiamas pro-T-limfocitais dar prieš jiems migdant į užkrūčio liauką. CD7 yra aptiktas daugumoje NK ląstelių, monocituose yra silpna raiška. B limfocitai ir granulocitai neturi šio antigeno. CD7 apibrėžimas naudojamas limfomų, vaikų T ląstelių limfoblastinės leukemijos diagnozei nustatyti.
• CD8 yra baltymas, susidedantis iš dviejų polipeptidų grandinių, sujungtų disulfido tilteliais. Tai išreiškiama citotoksinių ir slopinamojo T limfocitų, kurių sudėtyje yra 20-35% periferinio kraujo limfocitų, subpopuliacija. Šis antigenas taip pat turi NK limfocitus, kortikminius timocitus, 30% medulinių timocitų ir raudonųjų kaulų čiulpų ląstelių pogrupį. CD8 tiriamas siekiant kiekybiškai įvertinti T-slopiklio kiekį (žr. Skyrių "T limfocitai-slopikliai kraujyje" aukščiau).

• CD10 yra endopeptidazė, susijusi su ląstelės membrana. CD10 išreiškia jaunus B limfocitų formas ir kortikos limfocitų subpopuliaciją. CD10 išreiškia visas ląsteles ALL.
• CD11c ekspresuoti makrofagai, monocitai, granulocitai, NK ląstelės ir plaukuotųjų ląstelių leukemijos ląstelės ląstelių membranoje.
• CD13 - glikoproteinas išreikšta ląstelių mielomonocitinės serijos (kamieninių ląstelių, neutrofilų, bazofilų, eozinofilų, monocitų ir ląstelių mieloidinės leukemijos). Jis nėra T ir B limfocitų, eritrocitų ir trombocitų.
• CD14 yra paviršiaus membranos glikoproteinas. Tai išreiškia daugiausia monocitai ir makrofagai. CD14 yra aptiktas daugiau kaip 95% periferinio kraujo ir kaulų čiulpų monocitų. Ūminio mieloblastinės leukemijos metu pastebima stipri CD14 ekspresija. Ūminėje ir lėtinėje limfoblastinėje leukemijoje šis antigenas nėra išreikštas.
• CD15 yra oligosacharidas. Jis dalyvauja fagocitozės ir chemotaksijos procesuose. Šis antigenas yra subrendęs granulocitų ir Berezovskio-Šternbergo ląstelių paviršiuje. Hodžkino liga yra nustatyta CD15 antigeno išraiška. Ne Hodžkino limfomos CD15 dažniausiai nenustatyta.
• CD16 išreiškiamas ant granulocitų, monocitų, makrofagų ir NK ląstelių paviršiaus. Visi šio antigeno ekspresuojantys limfocitai turi galimybę nuo antikūnų priklausančio ląstelių citotoksiškumo. CD16 yra nustatomas, kai įvedami lėtinės mielocitinės leukemijos, norint apibūdinti NK ląsteles.
• CD19 yra glikoproteinas, kuris yra visų periferinių B limfocitų, taip pat visų B ląstelių pirmtakų. Jis plazmoje nėra. Tai ankstyviausias B-ląstelių žymeklis, vaidina svarbų vaidmenį reguliuojant B limfocitų aktyvavimą ir proliferaciją. CD19 ekspresuojamas visose neoplazminėse B-ląstelių ūmios leukemijos ląstelėse, taip pat yra kai kuriomis ūmaus monoblastinės leukemijos formomis.
• CD20 yra ne glikozilintas baltymas. B-limfocitų ontogenezėje CD20 antigenas atsiranda po CD19 limfocitų prieš B-ląstelių diferencijavimo stadijos. Plazmos ląstelių plazmos membranoje jos nėra. Ji ekspresuojama ALL, B-ląstelių lėtinės limfocitinės leukemijos, plaukuotųjų ląstelių leukemijos, Burkitto limfomos ir labai retai ūminės monoblastinės leukemijos atvejais.
• CD21 yra glikoproteinas, reikšmingas kiekis yra B limfocitų limfoidinių organų ir nedidelio kiekio periferinio kraujo B ląstelėse. CD21 yra Epstein-Barr viruso receptorius.
• CD22 yra baltymas, susidedantis iš dviejų polipeptidų grandinių. Jis išreiškiamas daugelio B limfocitų membranai, įskaitant progenitines ląsteles (prolimfocitus). Po aktyvacijos antigenas nėra išreikštas B limfocitais (plazmos ląstelėmis). Labiausiai išreikšta CD22 ekspresija yra aptiktos ląstelėse su plaukuotų ląstelių leukemija, silpnos - mieloidinės leukemijos ir ne T-ląstelių ALL.
• CD23 yra glikoproteinas, išreikštas periferinio kraujo aktyvuotų B limfocitų kiekiu. CD23 mediuoja IgE priklausomą citotoksiškumą ir fagocitozę makrofagais ir eozinofilais.
• CD25 yra vieno grandinės glikoproteinas, identifikuotas kaip mažo afiniškumo IL-2 receptorius. Šis receptorius išreiškiamas aktyvintomis T limfocitomis ir, esant mažesniam tankiui, aktyvintoms B-ląstelėms. Sveikas žmonių periferiniame kraujyje antigenas yra daugiau kaip 5% limfoidinių ląstelių.
• CD29 yra fibronektino receptorius. Jis yra plačiai paplitęs audiniuose, jis yra išreikštas leukocitais. CD29 aptikimas periferinėse kraujo kūnelėse yra tipiškas T ląstelių, turinčių CD4 + CD29 + fenotipą, pogrupius, kurie vadinami 2 tipo pagalbiniu (Th2) helperu. Šios ląstelės, gaminančios limfokinus, dalyvauja humoralinio imuninio atsako realizavime.
• CD33 yra transmembraninis glikoproteinas. Jis yra ant mieloidinių ir monocitinių serijų ląstelių paviršiaus. Jis randamas ant monocitų paviršiaus ir, kiek mažiau, periferinio kraujo granuliocitų. Maždaug 30% raudonųjų kaulų čiulpų ląstelių išskiria CD33, įskaitant mieloblastus, promielocitus ir mielocitus. Antigenas nėra pluripotentinių kamieninių ląstelių membranose. CD33 naudojamas mieloidinių leukemijų ląstelėms apibūdinti. Leukemijos limfų ir eritrozės kilmės ląstelės neišreiškia CD33.
• CD34 yra fosfoglikoproteinas, išreikštas hematopoetinių progenitorių ląstelėmis, įskaitant monopotentės kamienines ląsteles. Labiausiai išreikšta Ar išraiška yra stebima ankstyvaisiais protėviais; kai ląstelės brandžios, žymeklio išraiška krinta. CD34 taip pat yra endotelio ląstelėse. CD34 naudojamas ūminės mielogeninės ir limfoblastinės leukemijos ląstelėms apibūdinti. Su lėtinės limfocitinės leukemijos ir limfomos, CD34 antigeno išraiška nenustatyta.

• CD41a išsiskiria trombocitais ir megakariocitais. Monokloniniai antikūnai, skirti nustatyti CD41a, naudojami megakariblastinei leukemijai diagnozuoti. Dėl Glązmanno trombasthenijos šio antigeno išraiškos nėra arba yra gerokai slopinama.
• CD42b yra membraninis glikoproteinas, susidedantis iš dviejų polipeptidų grandinių. Markeris yra trombocitų ir megakariocitų paviršiuje. Klinikinėje praktikoje trombocitopatija - Bernard-Soulier sindromu diagnozuojama CD42b aptikta.
• CD45RA priklauso transmembraninių glikoproteinų grupei. Tai yra įprastas leukocitų antigenas. Jis ekspresuojamas B limfocitų ląstelių membranoje, mažesniu mastu T limfocitų ir brandžių medulinių timocitų. Markeris nėra išreikštas granulocitais.
• CD45RO yra mažos molekulinės masės CD45RA izoforma - įprasta leukocitų Ag. Jie randami T ląstelių (atminties T limfocitų), B-limfocitų, monocitų ir makrofagų subpopuliacijų. Monokloniniai antikūnai prieš CD45RO sąveikauja su daugeliu timocitų, atpalaiduojančių CD4 + ir CD8 + T limfocitų bei brandžių aktyvintų T ląstelių subpopuliacija. Šis antigenas taip pat turi ir mielomonocitinės kilmės ląsteles, granulocitus ir monocitus. Jis aptinkamas centroblasto ir imunoblastinių limfomų.
• CD46 - O-glikozilintas dimeeras. Ji yra plačiai pasiskirsto audiniuose ir išreikštas T ir B-limfocitų, monocitų, granulocitų, NK-kraujo kūnelių, trombocitų, endotelio ląstelių, fibroblastų, bet nėra dėl eritrocitų paviršiaus. CD46 užtikrina apsaugą nuo audinių nuo papildomo poveikio.
• CD61 yra trombocitų antigenas. Jis ekspresuojamas periferinio kraujo trombocitų ir raudonųjų kaulų čiulpų, taip pat megakariocitų ir megakariblastų. Jo apibrėžimas naudojamas kaip ūminės megakariboblastinės leukemijos žymeklis. Glanzmano trombastenija sergančių pacientų antigeno ekspresija nėra arba ją slopinama.
• CD95, dar vadinamas Fas arba APO-1, yra transmembraninis glikoproteinas, kuris yra auglio nekrozės faktoriaus receptorių šeimos narys. Jis yra reikšmingai išreikštas T limfocitų periferiniame kraujyje (CD4 + ir CD8 +), o mažesniu mastu - B limfocituose ir NK ląstelėse. Šis antigenas taip pat išreiškiamas granulocitais, monocituose, audinių ląstelėse ir neoplastinėmis ląstelėmis. CD95 susiejimas su Fas ligandu (CD95L) sukelia apoptozę ląstelėse.
• CD95L arba Fas ligandas, membraninis baltymas, priklausantis auglio nekrozės faktoriaus receptorių šeimos grupei. Šis antigenas yra išreikštas citotoksiniais T limfocitais, NK ląstelėmis ir labai dažnai - naviko ląstelėmis; pagrindinis apoptozės induktorius ląstelėse.
• HLA-DR yra pagrindinio žmogaus histocompatibumo komplekso (HLA) II klasės monomorfinis faktorius. Žymeklis, išreiškiant Langerhanso ląstelėse, dendritines ląsteles, limfinių organų, ir tam tikrų rūšių makrofagų, B limfocitų, aktyvuotų T ląstelių ir užkrūčio liaukos epitelinių ląstelių. Šio žymens testas naudojamas kiekybiškai aktyvintiems T limfocitams su fenotipo CD3 + HLA-DR +.

Naudojant skirtingą monokloninių antikūnų atranką žymenims, galima sukurti fenotipinį ląstelių, būdingų konkrečiai leukemijai, portretą.

Be to, naudojant immunophenotyping metodus diagnozuojant ir diferencinę diagnozę piktybinių kraujo ligų, ypač svarbu paaiškėjo jų naudojimą gydymo procese įvertinti remisija ir likutinės gyventojų Leukemija ląstelių būklę. Žinant fenotipo "portretą" sprogimo ląstelių diagnozės laikotarpiu, šių žymenų ji gali rasti Mobilusis Leukemija klonas remisija, o nuo jų skaičiaus padidėjimas - prognozuoti atkryčio ilgai (1-4 mėnesius) plėtrą, kol jo klinikinių ir morfologinių bruožų.

[1], [2], [3], [4], [5], [6]